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植物细胞核和细胞质提取试剂盒提供全套试剂，适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织，如叶片、根、种子等植物组织中提取核和细胞质。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的细胞细胞核/细胞质不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。
本试剂盒采用酶法提取，酶法提取制备的回收率提高，纯度高，保持天然活性，但是耗时较长。非酶法的提取试剂盒提取过程简单方便，速度快，可在1小时内完成，而且绝少交叉污染，但是回收率相比酶法较低。如果需要更加快捷的提取试剂盒，可以选择非酶法的提取试剂盒（相关产品HR9072），对提取速度没有要求的话，可以选择酶法提取试剂盒。请根据实际需要选择试剂盒。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
● 离心机● 振荡器● 匀浆机/Dounce匀浆器● 涡旋混匀器● 100μm细胞筛● PBS

组份	50T	100T
组份A：洗涤液A	25mL	50mL
组份B：提取液B	25mL	50mL
组份C：提取液C	25mL	50mL

2～8℃保存，有效期1年。


● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
● 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

• 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的100～200mg鲜嫩植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
  注：
  ● 也可用锋利的刀片划成尽可能小的碎片。
  
• 加入500μL洗涤液A充分混匀。
  
• 在30℃条件下静置15分钟。
  
• 在2000×g条件下离心10分钟，弃上清，收集沉淀。
  
• 在沉淀中加入500μL提取液B，充分混匀。
  注：
  ● 培养细胞1000×g条件下离心5分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞后用PBS洗涤2次，然后直接加入提取液B重悬。
  ● 大约每300μL细胞压积中加入1mL提取液B。
  ● 根据实际样本体积调整提取液用量，一般试剂是样本体积的2～3倍，充分淹没样本即可。
  
• 将提取液B样本悬液置振荡器上37℃～45℃或室温振荡24～72小时。
  注：
  ● 使用振荡器/摇床的较低转速，保证提取液能轻微晃动即可。
  ● 没有振荡条件也可以不振荡，中间每隔几小时用移液器吹打混匀即可。
  ● 根据下游核和胞质的应用选择合适的温度，最高温度为55℃时制备速度最快。但是温度过高会影响样本活性，请根据下游应用选择温度。
  ● 不同类型的植物样本需要处理的时间差异较大。拟南芥较易处理，鲜嫩叶片较易处理，年龄小的样本处理时间短。
  ● 部分细胞壁较厚的植物类型可能需要处理更长时间。可以延长至72小时以上处理以提高得率。
  
• 在2000×g离心5分钟，弃上清，收集沉淀。
  注：
  ● 有条件的话最好用100μm细胞筛网过滤提取液B处理液后，收集滤液再离心。
  ● 没有细胞筛可以不过滤。
  
• 用PBS洗涤沉淀一次。
  注：
  ● 在2000×g离心5分钟。
  
• 在沉淀中加入500μL试剂C重悬沉淀，充分混匀。用匀浆机/匀浆器匀浆。
  
• 置4℃振荡20～30分钟。
  注：
  ● 用振荡器/摇床的较低转速，保持液体稍微有晃动即可。
  ● 没有低温振荡条件可以不振荡，在2～8℃静置，稍微延长处理时间，中间每隔几分钟用移液器吹打混匀。
  
• 在4℃，800×g力条件下离心5分钟。
  
• 移除上清至另一干净离心管。上清为细胞质部分，沉淀为细胞核。
  
• 用相应的缓冲液重悬细胞核沉淀，将两个样本置冰箱备用或直接用于下游实验。

相关搜索：植物细胞核/胞质提取试剂盒-酶法，Plant cell nuclear / cytoplasmic Extraction Kit